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移液器专题汇总

[内容提要]:如何选择移液器,如何保养移液器,如何正确使用和维修移液器,本文为您全面解答。

目前,移液器已广泛应用于生物技术实验室、药学和化学实验室、环境实验室等等。下面将为您详细介绍移液器的相关信息:

一、移液器的分类  

二、移液器的工作原理

三、移液器知名品牌

四、移液器选购指南    

五、移液器的使用 

六、移液器使用注意事项

七、移液器的维护保养

八、移液器标称容量与测量结果误差允许标准

九、各类微量移液器特点

十、微量移液器的拆卸及安装步骤 

十一、微量移液器正确操作方法

十二、微量移液器校准 

 

一、移液器的分类

1.气垫式(内置)活塞移液器

2. 外置式活塞移液器

 

二、移液器的工作原理 TOP↑

活塞通过弹簧的伸缩运动来实现吸液和放液。在活塞推动下,排出部分空气,利用大气压吸入液体,再由活塞推动空气排出液体。使用移液器时,配合弹簧的伸缩性特点来操作,可以很好地控制移液的速度和力度。

三、移液器知名品牌 TOP↑

1. 艾本德(Eppendorf)移液器:作为移液器的发明者,艾本德在移液器市场近几年无论是在全球还是国内,都稳居第一。

2. 吉尔森(GILSON)移液器:吉尔森的移液器都是不锈钢活塞,其Pipetman系列移液器自上市以来,享誉数十年,以结实精准著称;但人体工程学元素很少,非常笨重,力气小的人如果长时间使用颇有些痛苦。

3. 芬兰雷勃(Finnpipette)移液器:雷勃现在是美国热电(Thermo Fisher)的子公司。其彩枪和白枪都是在中国生产的,采用塑料活塞,品质一般,但价格低廉,在中国市场的接受度非常高,与大龙一起是高校学生用的最多的产品。另外,其多道移液器性价比比较高,在中国市场接受度也很高。

4. 芬兰百得(BIOHIT)移液器:百得在欧洲也算得上是高档产品,但在中国却一直都没能体现其高贵的血统。其Proline系列上市已久,性能中庸,现在在国内生产,也是众多国内品牌的仿制对象。

5.德国普兰德(BRAND)移液器:普兰德在国内成名已久,但一直没有大作为——这可能与其区域代理的销售模式和非主流的产品特点有很大关系。普兰德的移液器用玻璃作为活塞的材质,其Transferpipette系列(灰枪和白枪),外形非常独特,但现在已逐渐退出市场。现在普兰德主推的是其整支灭菌的Transferpipette S系列,性价比有所提高,但外形则中规中矩,缺乏特色了。

四、移液器选购指南   TOP↑
                        

1了解移液器性能

即移液器的准确性和重复性对于绝大多数用户而言,购买之前检测产品性能既有难度又无必要。因此,主要还是依据制造厂商提供的技术数据。但在这里还是要说明两点:其一,不要轻易相信卖家的口头承诺,一定要查阅制造商提供的书面材料;其二,在全球移液器市场上影响较大的品牌,其提供的技术数据可信度更高。

2了解移液器的可靠耐用度

主要取决于移液器所用的材料。对于外壳,应当有较高的耐冲击性、耐腐蚀性和较低的导热性(如PVDF材质);对于活塞,目前市场上主要有不锈钢、陶瓷和塑料三种材质。不锈钢机械性能好、寿命长,只是不太适合用于强酸强碱的移液;陶瓷则有很高的耐腐蚀性,但机械性能较差。当然,优质的材料往往意味着更高的价格,所以需要综合考虑购买价格和寿命的因素。

3了解移液器人体工程学设计

主要可考虑以下几点: 第一,完成一个移液循环拇指的移动距离短,意味着舒适度更高; 第二,比较相同量程的移液器完成一次排液(一定要按到底)所需的拇指用力,这是影响舒适性的关键,用力越少意味着长期使用造成手指损伤的风险越小;第三,装卸吸头,同样是越省力越好; 第四,移液器的重量适中,过重会增加手的负担,但过轻也往往意味着材质可能差强人意; 第五,其它的辅助设计,如壳体的磨砂设计以及指钩设计,有助于进一步提高舒适性。SOCOREX在人体工程学方面,在全球移液器市场都处于领先的位置,在以上几点都有完美的表现。

五、移液器的使用 TOP↑

1.移液器量程的调节:在调节量程时,如果要从大体积调为小体积,则按照正常的调节方法,逆时针旋转旋钮即可;但如果要从小体积调为大体积时,则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度,再回调至设定体积,这样可以保证量取的最高精确度。在该过程中,千万不要将按钮旋出量程,否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪

2.移液器枪头(吸液嘴)的装配在将枪头(pipettetips)套上移液枪时,很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下,这是错误的做法,因为这样会导致移液枪的内部配件(如弹簧)因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散,甚至会导致刻度调节旋钮卡住。正确的方法是将移液枪(器)垂直插入枪头中,稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合

如果是多道(如8道或12道)移液枪,则可以将移液枪的第一道对准第一个枪头,然后倾斜地插入,往前后方向摇动即可卡紧。枪头卡紧的标志是略为超过O型环,并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。

3.移液的方法:移液之前,要保证移液器、枪头和液体处于相同温度。吸取液体时,移液器保持竖直状态,将枪头插入液面下23毫米。在吸液之前,可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时)。这时可以采取两种移液方法:

一是前进移液法。用大拇指将按钮按下至第一停点,然后慢慢松开按钮回原点。接着将按钮按至第一停点排出液体,稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。最后松开按钮。二是反向移液法。此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体,其原理就是先吸入多于设置量程的液体,转移液体的时候不用吹出残余的液体。先按下按钮至第二停点,慢慢松开按钮至原点。接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体,继续保持按住按钮位于第一停点(千万别再往下按),取下有残留液体的枪头,弃之。

使用步骤:

六、移液器使用注意事项  TOP↑

1.当移液器吸嘴有液体时切勿将移液器水平或倒置放置,以防液体流入活塞室腐蚀移液器活塞。

2.正确使用移液器吸液、排液,以达高精准度。

3.平时检查是否漏液的方法:

a.吸液后在液体中停 1-3

b.秒观察吸头内液面是否下降;如果液面下降首先检查吸头是否有问题,如有问题更换吸头,更换吸头后液面仍下降说明活塞组件有问题,应找专业维修人员修理。

4.需要高温消毒的移液器应首先查阅所使用的移液器是否适合高温消毒后再行处理。

5.使用完后,可以将其竖直挂在移液枪架上,但要小心别掉下来。当移液器枪头里有液体时,切勿将移液器水平放置或倒置,以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。

七、移液器的维护保养  TOP↑

1.如液体不小心进入活塞室应及时清除污染物。

2.移液器使用完毕后,把移液器量程调至最大值,且将移液器垂直放置在移液器架上。

3.根据使用频率所有的移液器应定期用肥皂水清洗或用 60 %的异丙醇消毒,再用双蒸水清洗并晾干。

4.避免放在温度较高处以防变形致漏液或不准。

八、移液器标称容量与测量结果误差允许标准  TOP↑

1.“标称量程”其实是一个完全错误的讲法,因为所谓的“量程”应该是一个范围内的事情,而在移液器的相关规程或标准中,并没有“标称量程”这种提及。我们注意到,在移液器相关的计算中,常常使用的一个词是“标称容量”,其定义是一定量程范围内的最大量程即称之为“标称容量”。因此,根据该定义的描述,可知,所谓的“标称容量”其实是一个容量“点”,而非一段容量“范围”,因此,使用“标称容量”的说法来代替“标称量程”的说法,想染更为贴切。以上我们所讨论的是对具有一定量程范围的移液器的“标称容量”定义,那么,对于没有一定容量范围的移液器,也就是固定容量的移液器,其标称容量是什么呢?很显然,如果是固定容量的移液器,其标称容量及时其固定容量。我们列举两个简单的例子以求更为明了。如可变量程范围是0.1-3ul的移液器,其标称容量是3ul;如国定容量100ml的移液器,其标称容量是100ml 

2.对于可变量程移液器的测量结果,其误差的要求如何呢?这里,就要应用到“标称容量”这个词。标称容量的定义前面已经提到,因此,对一支可变量程的移液器,则选择其有效量程范围内的最大量程作为其标称容量。注意,这里我们说的是“有效”量程,所谓有效量程既是移液器的生产商所宣称的量程。因为,现在市场上销售的多种移液器,其容量可调节的范围,往往都要超出其生产商宣称的范围。如10-100ul的移液器,其有效量程是10-100ul,但实际上,其最小值可以调节到7ul左右,最大值也可以调节到110ul左右,但这个范围7-110ul并不是厂家所宣称的该只移液器的量程,不是该只移液器的有效量程。因此,该只移液器的标称容量是100ul,而不是110ul

对可变量程移液器测量结果的误差标准,是以其标称容量来对比上述表1或表2来知道其误差范围的。如10-100ulA型移液器,对比表1,同时因其标称容量是100ul,查表1可知,其测量结果的最大系统允差是+/-0.8、最大随机误差是+/-0.3

九、各类微量移液器特点     TOP↑

1.整支可消毒移液器

可显示4位数字;整支移液器可高温高压消毒;具有独特的单操纵杆结构;设计有容量调节旋钮安全锁,避免移液过程体积发生变化;下端细长,便于从窄长容器中移取液体;小量程(小于100~d)移液器为金属活塞;大量程(大于100g1)移液器为夹芯陶瓷活塞,耐磨、抗腐蚀;可根据按钮颜色选择适配标准吸嘴;可进行三点校正。

2.半支可消毒移液器

移液器上下端可拆离,下端部分可高温高压消毒;外壳采用新型抗UV材料;多道可调移液器,分为八道和十二道两类;尖端的橡胶环能确保紧密结合。

3.电动移液器

具有三种操作模式(PIPDISFIX);液晶数字可显示吸取液量、连续加样次数和加样速度等多项指标;马达驱动加样,可充电;具有分配功能,最多可进行20次分配;可直接改变取液量,方便快捷;可直接测出余液量;可进行编程。

4.PCR专用移液器

主要用于PCR等精密实验;具有特殊的活塞吸嘴,确保无交叉污染;非空气活塞推动原理,手接触温度、液体的黏滞度等因素不会影响其精确度;具有独特的单操纵杆结构;可实行五点校正。

十、微量移液器的拆卸及安装步骤   TOP↑

1.微量移液器的安装步骤:

1)把活塞和弹簧装入移液器下半部。

2)把活塞固定器放在活塞上面,并把它按进下半部分的沟槽。

3)把下半部旋紧到上半部手柄(不要使用小工具)

4)按下脱卸按钮,装上脱卸筒套。

2.微量移液器的拆卸步骤:

1)往下按紧脱卸按钮,用力拉出脱卸套筒。可使用随移液器提供的小工具对下半支进行拆卸。

2)向左旋转下半支移液器,使其脱离把手。

3)按活塞固定器并移走(活塞有可能受弹簧弹力作用弹出)

4)卸下活塞和弹簧。

单道移液器拆卸方法:

多道移液器拆卸方法:

十一、微量移液器正确操作方法  TOP↑

1)按到第一档,垂直进入液面几毫米。

2.缓慢松开控制按钮,否则液体进入吸头过速会导致液体倒吸人移液器内部吸人体积减少。

3)打出液体时贴壁并有一定角度,先按到第一档,稍微停顿1s后,待剩余液体聚集后,再按到第二档将剩余液体全部压出。

黏稠或易挥发液体的移取

在移取黏稠或易挥发的液体时,很容易导致体积误差较大。为了提高移液准确性,建议采取以下方法:

1)移液前先用液体预湿吸头内部,即反复吸打液体几次使吸头预湿,吸液或排出液体时最好多停留几秒。尤其对于移取体积大的液体(1000~1),建议将吸头预湿后再移取。

2)采用反相移液法:吸液时按到第一档,慢慢松开控制按钮,打液时按到第二档即可,部分液体残留在吸头内。

常见的错误操作

1)吸液时,移液器本身倾斜,导致移液不准确(应该垂直吸液,慢吸慢放)

2)装配吸头时,用力过猛,导致吸头难以脱卸(无需用力过猛,选择与移液器匹配的吸头)

3)平放带有残余液体吸头的移液器(应将移液器挂在移液器架上)

4)用大量程的移液器移取小体积样品(应该选择合适量程范围的移液器)

5)直接按到第二档吸液(应该按照上述标准方法操作)

6)使用丙酮或强腐蚀性的液体清洗移液器(应该参照正确清洗方法操作)

十二、微量移液器校准  TOP↑

1.校准的基本操作条件

操作室:独立房间,显示温度和湿度状态。

温度控制:1530~C(±05)

湿度控制:60%~90%。

工作台面:防震、防尘、远离热源、无阳光直射。

天平:0000 01g精密分析天平(小数点后5),每年需由厂家进行校准。

防蒸发装置:Eppendorf提供的湿度阱,防止称量液体的挥发。

测试介质:双蒸水,每4h更换一次,批次更换周期不大于2周。

2.操作步骤

1)同温化处理:校正前,所有移液器及校正介质(工作台、天平、双蒸水等)置于相同操作间4h,以确保它们具有相同的温度。

2)内外部清洗。

3)润滑活塞。

4)校准:采用三点校准法,即根据移液器量程范围,选取最低量程、中间值和最高量程三点分别测试10次,各个测试点取其平均值,计算其准确度(accuracy)和精确度(precision),评价标准符合DIN 12650要求。

5)校准报告:可根据客户需求提供计算机打印的标准报告或PICASO校正报告,符合ISODINASTM相关标准。

 

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